・FAM-labeled M13(-21) universal primer:
FAM-TGTAAAACGACGGCCAGT
FAM以外に別の蛍光色素を付加することで，マルチプレックスも可能になる。

・A fusion of a leading M13(-21) universal sequence with the originally published primer sequence:
TGTAAAACGACGGCCAGTAGAGACTAGACAAGTTGCA
予測されたプライマー配列にM13(-21)を付加する。

PCR組成

2.0ul　5xBuffer
0.8ul　dNTPs
0.5ul　0.1nM Forward primer
2.0ul　0.1nM FAM-labbedled primer
2.0ul　0.1nM Reverse primer
1.0ul　Template DNA(0.1ng/nl)
0.2ul　GXL polymerase
1.5ul　water
---
10.0ul　Total

（注意）
taq系のポリメラーゼを使用すると，ピークが2つに分かれてしまう可能性がある。
そうすると，解析しにくい....

PCR反応条件

94°C: 5 min

94°C: 30 s |
56°C: 45 s | 30サイクル
72°C: 45 s |

94°C: 30 s |
53°C: 45 s | 8サイクル
72°C: 45 s |

72°C: 10 min

参考文献